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“恒远”发布关于定性定量检测技术
更新时间:2013-03-25      阅读:1389

   大环内酯娄化合物的相对分子质量均在500以上,而且连接有多数的极性基团,采用直接的气相色谱方式分析是不可行的,往往必须经过复杂的衍生化过程才可以进行气相色谱分析。因此,使用气相色谱法测定这类化合物的过程极为烦琐,样品前处理时间相当长,而且衍生化试剂消耗很多。另外,通用型的FID检测器无法辨认流出的组分,对复杂样品中的共流出峰缺乏指认和定量的手段,一般不用于残留分析。

Takasuki等曾建立了动物组织中红霉素、竹桃霉素、螺旋霉素、占他霉素、泰乐菌素的GC-MS分析方法。动物组织的甲醇提取液经过液-液萃取初步纯化后再使用硅胶小柱固相萃取,以除去可能的共流出物质。净化的提取物先在Pt催化下加氢,打开十六元大环中的碳-碳双键结构。要在0.3 mol/L的盐酸中部分水解掉中性糖链,再用乙酸酐吡啶试剂酰化。得到的产物通过一根50 cm长、填充涂覆5%OV-101固定液的白色Chromsorb载体的玻璃柱加以分离。具有十四元和十六元环系的大环内酯类药物质谱图的基峰分别为m/z=200m/z=258。这些碎片分别来自于连接在它们大环上经衍生乙酰化的脱氧氨基己糖和氨基碳霉糖。在选择粒子检测模式下,红霉素和竹桃霉素的检测限分别是10μg/kg100 μg/kg,十六元环系的为500 μg/kg

   液相色谱法紫外法已成为大多数大环内酯抗生素残留的分析方法。田洁等研究了罗红霉素含量与有关物质的快速HPTC分析方法,比较了快速Alltima C18[(53 mm×7nm3μm)、(33mm×7mm3μm]

与常规Alltima C18(250 mm×4.6 mm5 μm)3种色谱系统,发现前两者在分离罗红霉素和其他物质时与后者没有差别,但所需分

析时间上仅为后者的1/6l/3Huebra等采用HPLC-ECD法,以竹桃霉素为内标物质,用C18窄径柱对5种大环内酯类抗生素的标准混合物进行了全面优化分离.zui终测得人尿液中的罗红霉素和蔷薇霉素含量。他们还用此法对尿液中的10种抗生素进行了分析,采用C8反相柱梯度洗脱方式,罗红霉素为内标物质,使其余9种抗生素分离良好,每种药物的检出限低于3 ng,并测得尿液中每种药物的线性范围。Leal等用液相色谱法测定了鸡肉中螺旋霉素、替米考星、泰勒菌素、吉他霉素、交沙霉素、红霉素和竹桃霉素7种抗生素,研究了流动相的pH值、配比和流量、检测温度对峰形、保留时间的影响。对紫外检测器和二极管阵列检测器均作了比较研究。

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    Ngoh报道了用液相色谱法测定牛奶中替米考星,样品经离心脱脂,然后通过C18同相萃取柱净化,用紫外检测器在280 nm检测牛奶(50200ng/mL)中替米考星的回收率为97%~101%。Sololde等报道了应用固相萃取HPLC技术测定了牛奶中的泰乐菌素。采用c18色谱柱分离,用紫外检测器在287 nm检测样品,检测限为10 ng/Ml,加标水平在1 mg/L50μg/1时平均回收率分别为94%和89%,相对标准偏差RSD4%7%。

    史向国等建立了快速分析抗生素新药必特螺旋霉素中复杂多组分的液相色谱质谱联用(LC-MS)分析方法,采用电喷雾离子化源、正离子检测方式对各主要成分进行级全扫描,将对应的准分子离于峰进行二级全扫描质谱分析.通过与对照品的色谱和质谱行为对比,探讨了所得到的10种螺旋霉素类衍生物及其化学结构。Lim等报道了采用LC-MS测定比目鱼中的罗红素残留,在正离子检测方式下,选择离子为m/z=837.5,定量限为0.1μg/g Masakazu Horie等采用LC-ESI-MS测定肉和鱼中大环内醋抗生素残留,定量检出限为0.01 μg/g

 

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