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中科院胡老师反馈ELISA实验问题已提交技术部处理
更新时间:2015-12-09      阅读:961

    中国科学院高能物理研究所胡老师十月底在我司订购了人Human(NGAL)elisa kit。昨日老师反应实验已经做完,但是反应试剂盒除了滴加自带的标准物孔显色外,其他的加样孔都没有显色。胡老师并说明了实验样本都是血清样,其中部分样本稀释了一百倍,有几个血清样加了高浓度的NGAL。但实验结果不显色特我司技术出现这问题的可能原因?

    经技术沟通交流后胡老师同意将剩余试剂盒试剂及样本交由我司安排技术进行复测分析原因所在。现我司已收到老师的剩余样跟试剂,且已安排技术人员进行复测,并根据复测结果答复胡老师出现该情况的具体原因。

与此同时我司技术提出了如下的可能原因:

1.试剂已过效期,或不同试剂盒组分混用

2.错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B。

3.洗板及加样过程中,酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力。

4.终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配制。

5.蒸馏水有问题。

正确的解决对策

1.实验前检查试剂的组分及批号,确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用。

2.严格按说明书的步骤操作,加完试剂后可观察一下液面高度是否一致,以减少漏加现象

3.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净。

4.每次配制时都应看清标签标明物质。

5.确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染,与好蒸馏水比较。

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